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腺病毒包裝服務中腺病毒感染的特點
發(fā)布日期：
2016-09-21
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腺病毒包裝服務其主要原理是將目的片段克隆到腺病毒表達載體上，表達載體與腺病毒包裝質粒通過重組后導入腺病毒包裝細胞進行包裝，包裝好的病毒進一步進行擴增和滴度測定。目前較常用的系統(tǒng)如AdEasy，AdMax，以及invotrogen的穿梭系統(tǒng)。不同的包裝系統(tǒng)其表達載體與包裝載體發(fā)生重組的方式，場所都有所不同，如AdEasy系統(tǒng)是在細菌里發(fā)生重組的，重組的質粒線性化后轉染細胞可包裝成腺病毒，AdMax系統(tǒng)表達載體與包裝載體是在細胞中發(fā)生重組，invitrogen的穿梭系統(tǒng)則是體外重組。與傳統(tǒng)的轉染方式相比，如脂質體轉染、腺病毒感染具有以下特點：
1.可感染的細胞種類多，宿主范圍廣，幾乎可以感染所有類型的細胞。
2.感染效率高，特別適合質粒載體轉染效率低的細胞，如原代培養(yǎng)細胞，神經細胞等，且外源基因表達水平較高。
3.包裝外源基因的片段大，高達10kb。
4.腺病毒載體構建及包裝容易操作，易于制備出滴度高的大量病毒。
5.當腺病毒感染細胞后，病毒基因組存在于細胞染色體外，不整合到細胞染色體中，避免了因整合引起的基因突變及激活致癌基因，生物安全性高。
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