伊人久久大香线蕉,亚洲综合 第888页,婷婷 av 导航,男女激情床上19禁

咨詢熱線
15800446246
您的位置: 網(wǎng)站首頁 > 新聞資訊 > BCA蛋白定量試劑盒的使用方法和注意事項

BCA蛋白定量試劑盒的使用方法和注意事項

發(fā)布日期: 2022-11-12
瀏覽人氣: 4476
   BCA蛋白定量試劑盒是根據(jù)目前世界上常用的兩種蛋白濃度檢測方法之一——BCA(bicinchoninicacid)法研制而成,實現(xiàn)了對蛋白質(zhì)進行快速、穩(wěn)定、靈敏的濃度測定。本試劑盒的原理是蛋白質(zhì)分子中的肽鍵結(jié)構(gòu)在堿性環(huán)境下能與Cu2+絡(luò)合生成絡(luò)合物,將Cu2+還原成Cu+,而BCA試劑可敏感特異地與Cu+結(jié)合,形成穩(wěn)定的有顏色的復(fù)合物,并在562nm處有光吸收峰值,該復(fù)合物顏色深淺與蛋白質(zhì)濃度成正比,可根據(jù)吸收值的大小來測定蛋白質(zhì)的含量。1h內(nèi)即可完成蛋白質(zhì)定量檢測。本試劑盒含有牛血清白蛋白(BSA)溶液作為蛋白質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)溶液,測定范圍為20-2000µg/ml。
 
  使用方法
 
  1.融化蛋白標(biāo)準(zhǔn)品,取適量蛋白標(biāo)準(zhǔn)品稀釋至終濃度為0.5mg/mL。蛋白樣品使用什么溶液溶解,標(biāo)準(zhǔn)品也應(yīng)用什么溶液稀釋,但是為了簡便起見,也可以用0.9%NaCl或PBS稀釋標(biāo)準(zhǔn)品。將標(biāo)準(zhǔn)品按0、1、2、4、8、12、16、20μL加到96孔板的標(biāo)準(zhǔn)品孔中,加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液補足到20μL,相當(dāng)于標(biāo)準(zhǔn)品濃度分別為0、0.025、0.05、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5mg/mL。
 
  2.根據(jù)樣品數(shù)量,按50體積BCA試劑A加1體積BCA試劑B(50:1)配制適量BCA工作液,充分混勻。例如5mLBCA試劑A加100μLBCA試劑B,混勻,配制成5.1mlBCA工作液。BCA工作液室溫24h內(nèi)穩(wěn)定。
 
  3.加適當(dāng)體積樣品到96孔板的樣品孔中,也加稀釋液到20μL。
 
  4.各孔加入200μLBCA工作液,37℃放置20~30min。也可以室溫放置2h,或60℃放置30min。
 
  5.測定A562吸光值,540~595nm之間的波長也可接受。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算出樣品的蛋白濃度。
 
  注意事項
 
  1.蛋白標(biāo)準(zhǔn)品配制后可立即使用,也可以-20℃長期保存。
 
  2.BCA法測定蛋白濃度時,顏色會隨著時間的延長不斷加深。并且顯色反應(yīng)會因溫度升高而加快。如果濃度較低,適合在較高溫度孵育或適當(dāng)延長孵育時間以獲得更好檢測效果。
 
  3.因為延長孵育時間會引起吸光值的變化,所以在用紫外分光光度計檢測時,應(yīng)盡可能加快檢測速度,以免先檢后檢產(chǎn)生系統(tǒng)誤差。
 
  4.標(biāo)準(zhǔn)蛋白液的加量應(yīng)當(dāng)準(zhǔn)確,如果加量不準(zhǔn)確,會導(dǎo)致制作出來的標(biāo)準(zhǔn)曲線出現(xiàn)偏差,影響待測樣品的濃度計算,所以一方面需要用梯度稀釋的方法來配置標(biāo)準(zhǔn)蛋白液,另一方面應(yīng)使用精確度高的移液槍。
色射射天天天干干干| 啊啊啊啊啊啊国产| 两个人免费观看无码破解视频| 久久AⅤ无码精品人妻系列夜色| 天天日日草美女| 极品骚| AV天堂久久久精品| 久久91精品国产91久久小草| 亚州欧美日韩骚货| 无码在线肉| 国内女人喷潮完整视频| 精品国产自产91精品| 精品无码一级毛片免费少妇无码 | 欧美三级一区二区| 有板有雪和老外| 国内精品综合久久久40P| 在线精品国产一区二区三区88| 日韩在线色图| 人妻伦理av| 国产日韩综合一区| 中文写幕一区二区三区免费观成熟| 国产成人AV电影在线观看第一页| 91在线视频观看| 老司机亚洲精品无码| 99色免费在线| 欧美黄片国产| 亚洲欧美久本道| 777777欧美| 国产精品久久久久一级毛片| 汕尾市| 欧美色图一区在线视频| 亚洲国产AⅤ精品一区二区的游戏 国产又爽又黄又无遮挡的激情视频 | 亚洲日韩精品AⅤ片| 91神马精品一区二区| 久久www影院人成免费| 亚洲一级a| 国产精品高精视频免费| 国产成人精品三区在线观看| 久久久久久久久久久韩国男女 | 手机看片久久蜜桃| 十四岁带血AV毛片|